‘J9’日立电镜-Gatan3View联用技术在生物细胞三维重构的应用

2024-11-10点击量：116

利用SU5000和Gatan3View2XP对老鼠肝细胞横截面的高分辨横截面观测图1.老鼠肝细胞高分辨BSE图像仪器：热场发射SU5000，Gatan3View2XPSEM（加快电压:2kV,真空模式:低真空）3View（图像大小:16k×16k,像素点尺寸:2nm/pixel,观测区域:33mm×33mm）图.1为老鼠肝细胞整体染色并树脂包埋后的高分辨横截面观测结果，图中可观测到整个细胞及细胞器的产于。右图是左图朱框内区域数字缩放5倍后的结果，图中可显著观测到细胞核(N)及其附近的内质网(ER)，线粒体(M)及嵴(←),高尔基体(G),糖原颗粒(▲)产于。利用SU5000和Gatan3View2XP对老鼠肝细胞超薄切片观测及三维重构(a)超薄切片观测图像(b)三维重构结果（宽为10μm的正方体）(c)三维重构(XY面,YZ面，XZ面）图2.老鼠肝细胞倒数切片及三维重构结果图.2为老鼠肝细胞染色树脂包埋后倒数切片（a）及三位重构（b）（c）结果。三维重构图像可以通过300张横截面图像填充计算出来获得。

由于热场发射电子枪束流的稳定性，可倒数长时间地摄制提供300多张的图像。通过三维重构的结果可直观地看见细胞尺寸结构及其细胞器的三维产于，能更好地提供生物细胞的信息。利用SU5000和Gatan3View2XP对老鼠肝细胞三维重构结果分析图3.(a)倒数横截面BSE图像填充图像结果(b)线粒体及细胞核体产于(红色为线粒体，绿色为细胞核)（c）线粒体的尺寸产于直方图通过倒数切片取得的三维重构结果，可选择性的获得所须要信息，如线粒体的产于，结构，尺寸数目的面产于及体产于等。

图3为三维填充图及先前分析出有的线路体（红色）及细胞核（绿色）的分布图。可直观地观测到线粒体的形状，结构及产于。

图2表明的是线粒体的尺寸产于直方图,可通过软件必要获得线粒体的体产于和面产于，进而分析细胞内线粒体的数目及产于。仪器：热场发射SU5000Gatan3View2XP三维重构：ImageProPremier3D(MediaCyberneticsInc.)SEM条件：加快电压　2kV真空模式　低真空3View条件：图像尺寸　8k×8k像素尺寸　4.。

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